Prilikom rukovanja mikroorganizmima važno je pravilno koristiti aseptičku tehniku-kako biste spriječili kontaminaciju mikroorganizama vanjskim silama, kao i kako biste zaštitili sebe i ljude oko sebe.
Koraci
Korak 1. Zaštitite se
Vežite dugu kosu, nosite laboratorijski ogrtač i zaštitne naočale.
Korak 2. Operite ruke i radni prostor
Operite ruke vodom i sapunom i poprskajte klupu sa 70% etanola.
Korak 3. Postavite svu svoju opremu
Prije početka provjerite imate li sve spremno za rad.
Korak 4. Uključite bunsen plamenik što je više moguće
Trebat će vam za sterilizaciju vaše opreme, a propuh prema gore sprječava da vanjski zagađivači padnu na vašu kulturu.
Okrenite ovratnik tako da je strujanje zraka potpuno otvoreno
Korak 5. Sterilizirajte inokulacijsku petlju
Držite ga pod kutom otprilike 45 ° prema dolje i polako ga pomičite kroz plamen tako da vruće zasvijetli crveno-bijelo.
- Najlakše je držati petlju između palca i pokazivača, a podupirati je srednjim prstom.
- Najtopliji dio plamena nalazi se točno na vrhu unutarnjeg plavog vatrenog stošca.
Korak 6. Drugom rukom zgrabite svoju izvornu kulturu
- Ako se radi o tanjuru, držite ga i ručicom otvorite poklopac tek toliko da petlja uđe unutra.
- Ako se radi o cijevi s poklopcem, upotrijebite ružičasti prst ruke s kojom držite petlju za cijepljenje da biste uklonili poklopac, a zatim brzo dvaput otvorite cijev kroz plamen bunsenovog plamenika. To se naziva plamtenje i ubija sve što želi ući u cijev te stvara konvekcijsku struju koja tjera zrak iz cijevi tako da ga ništa ne može dobiti. Držite se za poklopac s ružičastom bojom za sljedeći korak.
Korak 7. Inokulirajte
Dodirnite petlju cijepljenja koloniji koju želite pokupiti. Ako cijepite iz tekuće juhe, umočite petlju cijepljenja u epruvetu i protresite petlju kako biste bili sigurni da ćete dobiti dovoljno bakterija.
Korak 8. Zatvorite izvornu kulturu
Ako se radi o tanjuru, samo zatvorite poklopac i vratite ga natrag. Ako se radi o cijevi, dvaput provucite otvor kroz plamen bunsenovog plamenika, a zatim vratite poklopac.
Korak 9. Otvorite novu ploču
Kao i prije, slobodnom rukom otvorite poklopac tek toliko da otvorite petlju
Korak 10. Pločujte bakterije
Lagano prevucite petlju cijepljenja po površini, pazeći da ne prodre u agar.
Uobičajen uzorak pruganja je metoda kvadranta
Korak 11. Zatvorite ploču
Korak 12. Sterilizirajte inokulacijsku petlju
Kao i prije, držite ga pod kutom od 45 ° prema dolje i polako ga pomičite kroz plamen tako da postane vruće crveno-bijelo.
Savjeti
- Općenito, rukavice nisu potrebne. Svi gore navedeni koraci služe za zaštitu i vas i vaših bakterija, pa je rizik od kontaminacije vrlo nizak. Rukavice mogu izazvati gadne opekline ako ih slučajno dodirnete vrućom omčom za cijepljenje.
- Imajte na umu da radite s vatrom. Nije velika stvar, samo budite sigurni da znate što učiniti ako se opečete; pauzirajte eksperiment, isperite opeklinu vodom i, ako je potrebno, obavijestite svog nadzornika.
- Ako radite više puta i morate koristiti aseptičku tehniku, nije potrebno potpuno isključiti bunsenov plamenik između pokretanja - samo ga spustite do upravljačkog plamena i isključite ga do kraja tek kad završite.
